成都华西华科研究所分析肝硬化性骨质疏松动物模型与QCT骨密度软件体模检测

肝硬化性骨质疏松动物模型（Osteopenia induced by cirrhosis)

基本原理：胆汁淤积性肝病（CLD)可并发骨质疏松， 发生非外伤性骨折，CLD并发骨质疏松的病因仍未完全 明确，目前肝内胆汁淤枳被认为是主要原因。肝内胆汁 淤积使肠腔内胆盐减少，引起维生索D、钙吸收障碍。冇 研究发现胆红素浓度升高抑制成骨细胞增殖，而骨质疏

骨湿重：取剔除干净软组织后的双侧股骨用电子分析天 平称取湿重精确至0.1 mg，用DPX双能X线#密度仪 测童大鼠双侧股、胫#骨矿含馕和骨密度，分别精确至

1.  0丨g和0.01 g/cm²>,取测设骨密度后的双侧股骨用 WD万能材料试验机进行股骨3点弯曲试验，试件跨度 18〜22mm，加载速度lmm/min测算出股骨的弹性模童， 屈服强度，断裂强度，断裂能盘吸收和刚度系数等生物力 学指标。收集完成生物力学测量的双侧股骨g于烘箱中 105± It：烘干lh,转人高溢炉内800C灰化lh，干燥器中 冷却至室温，电子分析天平测量灰重，精确至O.lmg.取 完成骨密度测最后的双侧胫骨，选取近侧干骺段200 mL/L甲醛固定，石蜡包埋，6/xm切片，苏木精-伊红 (HE)染色，镜下观察双侧胫骨骨组织形态有无改变。结 果固定2w和4w,右后肢肌肉明显较左后肢萎缩，骨骼短 小；固定2w后，右后肢股钟挝重比对侧平均下降了约 30%,灰重比对侧下降了近50%,骨密度比对侧下降了 30%,有统计学差异；同时生物力学指标值也均明显地较 左后肢低，结果有统计学差异；组织学显示右后肢胫骨近 袖骨小梁明M地比对脷稀疏，破骨细胞增加等，符合骨质 疏松的组织学改变。实验表明腿尾固定法是一个成功、 简便的制造废用性骨质疏松大鼠模型的新方法^[wl。

(二）   尾吊法的大鼠废用性骨质疏松模型

操作步骤:2月龄和6月龄普通级雄性SD大鼠各16 只，适应喂养1周后，随机分至2 ,6月龄尾吊实验组及 其同龄正常对照组共4组，每组8只。M吊组与对照组 均单独喂养于相同笼具。尾吊组采用陈杰等改进的 尾邢悬吊方法，使大鼠头低位身体倾斜与水平面呈3(T 角，后肢悬空不负重，前肢者地可自由活动、觅食饮水。 饲料标准大鼠饲料，并使每日摄食设相当，饮水不限。室 温(22±2)t：，保持12h光照和黑暗交替。尾吊期间密 切观察大鼠生活情况（包括饮食、饮水、活动、皮毛色泽 等），M吊前、尾吊第3、7、U、15、19、23d及第28d尾吊结 束时用天平（稍确度0.5g),歌复称M大鼠体取。计算各 组大鼠在各时间点的平均体重，用体重变化曲线来表示 尾吊期间大鼠的生长发育情况。大鼠尾吊第28d,过M 1%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉处死。取右胫骨去除附宥 软组织，用生物材料试验机测负重骨生物力学性能，灰化 法和原子吸收分光光度法测骨矿盐和钙含结果： ①尾吊引起鼠胫骨体积湿重、干東和骨矿物盐含量明显 减少（PCO.OU,其中，胫#体积湿重减少与年龄有关（P <0.05);②2月龄和6月龄尾吊鼠骨矿盐含M分別减少 4.32%,2.78% ,与骨钙丢失程度0.53 %, 3.05%并不 一致；③除弹性负荷外（P>0.05)尾吊使负重骨各力学 指标显著下降（P< 0.01)，且最大挠度和M大负荷下降 与月龄有关（P<0.05);结论肢体废用对不同发育阶段 大鼠负重骨的影响程度并不相同^IM]。

(三）   坐骨神经切断致大鼠骨质疏松

操作步骤：8月龄雄性Wistai■大鼠24只，随机分为3 组，每组8只：假手术组（SHAM组）、去坐骨神经组（SN

组）及骨膦组（BP组）。去坐骨神经组及骨膦组大鼠在左 侧大转子与坐骨结节之间切开皮肤，切断坐骨神经。骨 瞬组术后次日起给予骨膦皮下注射，剂童5 mg/ kg，每周 2次，共8w。各组大鼠均饲以常规饲料，自由饮用去离子 水。第8周末行股动脉放血处死大鼠。用骨生物力学、 骨病理组织学及骨形态计量学等方法对骨膦的药效进行 评价。结果：与SHAM组比较.SN组骨抗弯力、骨小梁 体积密度及骨小梁平均宽度、成骨细胞指数明M降低，而 破骨细胞指数及尿羟脯氨酸升高；提示坐骨神经切断可 致骨丢失，骨膦可有效防止坐骨神经切断所致的失 骨^[67] 〇成都华西华科研究所分析研发定量CT QCT骨密度体模软件分析系统  
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