成都华西华科研究所研发生产定量CT QCT骨密度体模软件分析系统骨质疏松维生素D受体基因多态性与QCT骨密度体模软件检测骨质疏松方法

原发性骨质疏松足多因子疾病，遗传因索对骨密度 (bone mineral density, BMD)值变异的影响达 60% 〜 80%。在若干候选基因中关于维生索D受体（Vitamin D receptor, VI)R)基因的研究最为广泛。

—、VDR 基因多态性（Vitamin D receptor gene polymorphisms)

基因多态性是指DNA序列的某些碱基发牛了突变， —个基因可产生一种以上不同的形式（又称一个基W的 不同基因型），而且在人群中的发生率超过丨％。箪因多 态性决定了个体之间的差异。从1988年Bakei■等克降 出人类VDR的cDNA至今，尤其是近几年人们逐渐认识 了 VDR基因的主要位点和结构。VDR基因位于12号 染色体中心部位的ql3. 1区，长度大于100kb，包括8个 外显子（外显子2-9)、1个延长的能够引起大M组织特 异性转录的启动子区（la - If),及3’端非翻译区（un­translated region ， UTR)")₀

利用不同限制性内切酶识别特殊位点发现了一些可 能具有功能的VDR基因多态性。目前比较受关注的有 以下8种◊在VDR基因3’端第8内含子中有BsmI (A/ G)、Tru9I (G/A>、EcoRV (G/A)、Apa丨（G/T)和第 9 外 显子中丁叫丨（C/T)等限制性片段长度多态性（restriction fragment 丨ength po丨ymorphisms，RFLP)。5’端第 2 外显 子中FokIRFLP(C/T)(又称为启始密码多态性h位于 le启动子中的Cdx2 (肠特异性转录因子结合位点）（G/ A)多态性^[21。3’袖UTK的聚腺铨酸（P〇|y A)重复长短 多态性（variable number of tandem repeat，VNTR)(又称 3’ UTR Poly A微卫星广)。一般用b,a,t,f分别表示Bsml、ApaI、Taq丨、和Fok I四种内切酶的多态位点，用 B，A，T，F则表示缺乏这些多态位点，纯合子为BB、AA、 TT、FF型或沾、肪、《、〖〖窀，杂合子为他、八₈、丁1、幵型。 Cdx2多态性则以G表示多态位点，A表示缺乏多态位 点，纯合子为GG或AA型，杂合子为0八型_& 3’端UTR Poly At g长度：腺苷酸虽复数>17用L表示，腺苷酸 歌复数在13〜17之间用s表示。

VDR箪因多态性连锁不平衡和单元型的研究资料 有限，在VDR基因3’端Bsml、ApaI和Taq丨多态性间可 能有的单元5?为单元型丨：baT,单元型2:BAt,单元 甩3:bAT。同时研究还发现b等位基因与长PdyA, B等位基因与短PolyA有较强连锁baT型与长Poly A，BAt短P₀丨yA有较强连锁^[<]。几个研究都没有发现 FokI多态性与其它位点连锁不平衡。没有资料报道 Cdx2多态性与其它位点连锁情况。

关于基因多态性的研究进展迅速，还有一些目前没 有命名的多态性。可以通过一些生物信息数据库获取最 新资料，常用的数据库有NCB1单核苷酸数据库但应对数据库中基因多态性的新报道进一步实验确证。

二、VDR基因多态性在人群中的分布（Dis­tribution of vitamin D receptor gene polymor­phisms in multitude)

从文献中可以看出VDR基因多态性在不同国家、甚 至N—国家的不同种族之间的等位基因頻率分布是不同 的，现将多数研究结果归纳在表3-丨中^:u。VDR基因 多态性在各种族间的等位基因频率不同，说明不同种族 人群钙吸收、BMD及骨叻疏松发生率不同的原因。

表3-丨三个种族中VDR等位基因頻車分布

等位基因頻率（％)

基因多态性	等位基因	离加 索人	亚洲 人	非洲 人
单位点基丙多 态性 Cdx2	A	19	43	74
FokI	f-T	34	51	24
Bsml	B	42	7	36
Apal	A	44	74	31
TaqI	T	43	8	31
Poly A	s n - 13 - 17	41	12	29
Bain - Apa - T叫单倍 5f haT:单倍		43	75	26
	Bat:单倍切2	39	7	16
	bAT:单倍3	11	17	59

三、VDR基因与骨代谢（Vitamin D receptor gene polymorphisms and bone mineral me­tabolism)

研究VDR苺因多态性对骨代谢的影响是分析VDR

基因多态性与血中骨钙素、PTH、骨碱件磷酸酶、25(OH) D等骨代谢指标的关系，其中血淸骨钙素水平是骨形成 的特异而敏感的指标。文献中以Bsm丨基因多态性与# 代谢生化指标的研究最多，Mormson等³¹萏先报道BB型 者血淸骨钙素水平明显卨于bb項者，此后对不同人群甚 至同一种族人群的研究结果不一致。Andre等¹¹³分析了 17篇文献，其中7篇Bsml基因多态性与血淸#钙素无 关,8篇观察到BB划者血淸骨钙素水平高于bb型者，另 3篇却发现bb甩者血淸骨钙素水平最离。MeClure等〜 报道墨西哥白人妇女BB、AA和tt者血淸PTH水平高。 Sheehan等^报道Taq丨多态性中tt型健康希腊人的血淸 骨钙素水平明显高于Tt型或TT型。Tokita等^:8)检测 曰本绝经前妇女发现与bb沏绀比较，Rb型组的骨钙家 和竹碱性磷酸酶高20%〜30%,同时血淸钙较低，1,25 (OH)2D3较商。由此可见VDK基因多态性可能影响骨 转换。

四、VDR基因多态性与BMD( Vitamin D re­ceptor gene polymorphisms and bone mineral den­sity)

在VDR基因多态性与BMD关系的报道中，研究方 法包括横断面调查、长期跟踪研究、膳食钙摄人最或维生 家D营养状态的协同作用等，研究对象包括绝经前妇女、 绝经后妇女、靑少年男女和成年男性，既有单一 DVR基 因多态性与BMD关系的分析，近年来又有多位点的连锁 不平衡与BMD关系的报道。但研究结果不完全一致， VDR基因多态性与BMD有关系的报道和无关系的报道 约各占50%。对同一种族人群各研究的结果也不相同。

认为 3•端 Bsml -、ApaI -、TaqI _ RFLP 与股骨颈 或腰椎BMD密切相关的研究，均证实BB、AA和tt型携 带者BMD明显低于bb、aa和TT型携带者的BMD，也低 于Bb、Aa、和Tt型携带者的BMD。仅Houston等⑷的研 究结果相反，发现英国苏格兰绝经前和绝经后妇女携带 BB甩者股骨颈BMD和睹椎BMD均高于携带bb型。

发现FokI多态性与BMD冇关的研究显示ff型妇女 股骨颈的BMD比FF咽或Ff型的BMD低。目前仅有 2篇文章报道了 Cdx2多态性与绝经后妇女BMD的关 系，Arai等^^]发现绝经后妇女AA型基因携带者腰椎骨 密度明M高于GG型者23%,或AG沏基因型者20%。 但绝经前妇女各基W型携带者间腰椎骨密度无显著性差 异。在白人妇女中结果相似^m1。Grundberg等⑴对瑞典 343名年轻妇女调査结果显示3’ UTR Poly A微卫星与 BMD关系，LL型者腰椎BMD高于ss型者，而且3 ’ UTR Poly A微卫里与Bsml多态性间存在连锁不平衡。

Kim等~对朝鲜417名绝经后妇女研究发现携带 baTL单倍划者股#颈BMD和腰椎BMD较高。章振林 等^:u:通过两因素ANOVA协同分析了 VDR基因4个多 态性与北京地区汉族绝经妇女BMD值的关系，发现 VDR基因FokI多态性M然与绝经后妇女BMD值无关 联，但FokI多态性可与VDR3 ’端多态性（Apa丨和Taql)协同影响绝经后妇女的BMD。

VDR基因多态性对BMD的关系可能受膳食钙摄人 M和维生素D营养状态影响。Kiel等¹^对美国妇女研 究显

示在bb型组中，勝食钙摄人M>800mg/d者的BMD 明显高于膳食钙摄人fi<500mg/d者的BMD,而在Bb 型组和BB甩组则没有观察到该现象。Bemad等％在西 班牙绝经后妇女中发现，在BB型组中比较股骨颈BMD, 血淸25(OH)D水平正常者明显高于血淸25(()H)D水平 低者。

五、 VDR基因多态性与骨质疏松性骨折 (Vitamin D receptor gene polymorphisms and os­teoporotic fracture)

美国一项对9704名65岁以_h妇女的前雎性研 究表明，经年龄、牌食钙摄人M、补充钙剂、补充维生 素D和口服雌激素等因索校正，TaqI和Apa丨多态性与 髋部和椎体骨折发病率无关，提示VDR基因多态性不能 预测骨质疏松性骨折_d英国和西班牙的一些研究也没有 观察到V1)K基闪多态件与骨质疏松性骨折有关。但 Colin等^:|61对荷兰妇女的研究发现VDR基因3’端单倍 甩1可能协N雌激索受体基因与椎骨骨折有关。

妇女绝经G骨丢失请和丢失速度是发生骨质疏松引 起骨折的主要闪素，尽管一些研究发现了某些VDR基因 多态性与fl•丢失率有关，但近期研究发现¹¹⁷¹ VDR基因 多态性如出m丨多态性对竹丢失率的影响主要在绝经初 期，绝经3年后影响程度较小。这可能说明VDR基因多 态性对骨质疏松性骨折发牛率影响小。

六、 VDR基因多态性与骨质疏松治疗（Vita­min I) receptor gene polymorphisms and treat- ment of osteoporosis}

VDR苺因多态性影响骨质疏松的药物治疗。Andre 等~总结了 9篇近期关于药物治疗的报道，包括维生素 D、钙剂、皮质类阂醉、雌激素和羟乙基磺酸盐，通过BMD 变化反映药物治疗效果。其中4篇报告BAt ■携带者药 物治疗效果好于携带baT型者。但3篇结果正相反，携 带baT增者治疗效果优于携带BAt者。另2篇没有观察 到VDR基因多态性与药物治疗的关系。上述实验观察 期为1〜2年。Kurabayashi^P¹⁰对H本妇女在雌激素转 代疗法治疗中长期观察BMD与T_aqI、ApaI和Fok丨基N 多态性的关系，结果M示服药1年时TT铟组腰椎BMD 增加值明显高于Tt型纽；服药2年时两组BMD增值略 有不同，但没有统计学意义；服药3年后两组BMD增悄 没有显著性差异。

VT)R箪因多态性与骨质疏松关系研究的实验在不 间人群、地K中重S性差，可能由于VDK箪因多态性分 布在种族间差异较大，世界各地生活方式、生活环境不 同，VDR基因内、VDR基因与其他基因间连锁不平衡等 因素导致。为明确VDR基因多态性对骨质疏松的影响在我@尚需开展多项研究，尤其应系统全面地研究我国人群中各种VDR基因多态性的分布，从预防和治疗等各方面进行大样本长期观察，为我国钟质疏松的防治提供理论依据〇
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