联合检测GADA、ZnT8A和IA-²A对¹型糖尿病诊断价值与糖尿病早期无创检测诊断方法

【摘要】目的评价胰岛细胞GADA、ZnT8A、IA-2A三种自身抗体在1型糖尿病患者中的诊断价值。方法1型糖尿病患者⁷8例，其中男 性50例，女性28例，发病年龄20~41岁；2型糖展病患者80例，其中男性51例，女性29例，平均年龄40-70岁；105例健康者血清， 采用免疫印迹法检测血清GADA, ZnT8A、IA-2A三种自身抗体。结果1型糖尿病患者中，GADA、ZnT8A、IA-2A三种自身抗体阳性率 分别为53.1%、24.1%、23.7%。1型糖尿病患者中，三种抗体阳性率均高于2型糖尿病患者和健康对照组，差异有统计学意义(尸<〇.〇5)。 三种抗体之间在1型糖尿病患者中阳性率有差异，提示1型糖尿病患者不同自身抗体出现在病程的不同阶段。结论GADA、ZnT8A、IA- 2A的检测对1型糖尿病的诊断具有一定价值，联合检测三种抗体具有互补性，可提高1型糖尿病诊断的灵敏度。

近年的流行病学显示^[11,我国患糖尿病的人数约1亿，且发病率不 断上升。目前糖尿病已严重危害人类健康，依其病因学可分为1型和2 型。1型糖尿病发病原因是由于胰岛素的合成和分泌减少，2型糖尿病 以胰岛素抵抗为主，同时伴有胰岛素分泌不足。明确地分型有利于疾 病的治疗和预防。1型糖尿病是由于自身免疫介导的P细胞破坏，1型 糖尿病患者体内在出现临床症状前，存在多种自身抗体，如：如谷氨 酸脱羧酶自身抗体（GADA)、锌转运体8抗体（ZnT8A)、蛋白酪氨 酸磷酸酶抗体（IA-2A)等。现虽有文章报道胰岛相关抗体检测的临 床意义，但由于研究样本含量多少不一，且在不同人群中检出率有差 异。因此，本研究检测1型和2型糖尿病患者血清中GADA、ZnTSA、 IA-2A的检出率与正常人群中检出率之间的差异，同时，比较1型和2 型糖尿病患者血清中GADA、ZnT8A、IA-2A的检出率的差异，进一 步揭示与胰岛，关的自身抗体检测对鉴别诊断1型糖尿病的意义。

1材料与方法

1.1研究对象：研究对象为我院2011年3月至2013年8月收住我院的78 例1型糖尿病。人选病例中，男性50例，女性28例，发病年龄20~41 岁，平均年龄28.4岁，均符合1999年WHO糖尿病诊断标准，有酮症倾 向者，并且依赖胰岛素治疗。2型糖尿病患者为同期我院门诊与住院 患者80例，该组患者平均年龄51.4岁（40〜70岁），其中男性51例， 女性29例。入选病例均符合1999年WHO糖尿病诊断标准，初次确诊 糖尿病距今3年内；排除继发性糖尿病半年内无酮症或酮症摩中毒发 生。正常人群即健康组为同期在我院进行体检的健康者105例，男性 69例，女性36例，平均年龄37.8岁（20~65岁）。

1.2标本留取：空腹抽取静脉血2 mL，排除样本中的可能含有溶血和 高脂血，最迟2 h血清可分离完毕。

1.3检测方法：用免疫印迹法检测。使用免疫印迹试剂盒（深圳伯 劳特生物制品有限公司）进行检测，其原理是抗原抗体反应，将 GADA、ZnT8A、IA-2A特异性抗原包被硝酸纤维膜上，与被检样品 中特异性的Igq抗体反应，形成抗原抗体复合物，之后与有抗人IgG的 免疫酶试剂反应，依据显色条带进行判断结果。

1.4统计学处理：使用SPSS15.0软件进行统计分析，组间进行f检验， 当P<0.05时，为差异具有统计学意义。

2结果

1型糖尿病组、2型糖尿病组和健康组GADA、ZnT8A、IA-2A检 测阳性率比较显示：1型糖尿病组，三种抗体的阳性率依次为GADA

>ZnT8A>IA-2A。1 型糖尿病组中GADA、ZnT8A、IA-2A抗体检 出率明显高于2型糖尿病组，P<0.05。1型糖尿病组、2型糖尿病组 GADA、ZnT8A、IA-2A检测均显著高于健康组（P<0.05)，见表1。 表1   1型糖尿病组、2型糖尿病组和健康组GADA、ZnT8A、IA-

2A检测阳性率比较[n (%)]

组别	GADA	ZnT8A	IA-2A	抗体阳性
1型糖尿病组	41(52.6)	19(24.4)	18(23.1)	51(65.4)
2型糖尿病组	13(16.3)	4(5)	5(6.3)	21(26.3)
健康组	1(1)	0(0)	1(1)	2(1-9)

3讨论

糖尿病是一种常见的慢性病，研究发现胰岛P细胞与糖尿病的发生 关系密切，胰岛自身抗体作为胰岛P细胞免疫损伤，能够区别1型和埋 糖尿病^p1。胰岛素自身抗体主要有GAD-Ab、ICA等。GAD65-Ab*糖尿病 患者的病程发展稳定性较好’对于糖尿病的免疫治疗具有重要意义^ffl。

乂13吨等^[41研究发现ZnT8是1型糖尿病的又一主要自身抗原，其抗 体在诊断和预防1型糖尿病方面，具有重要意义。ZnT8含369个氨基 酸，属于CDF (阳离子扩散易化）家族，编码基因SLC30A8 (染色体 8q24.ll) ' ZnT8mRNA主要表达在胰岛细胞上，由激光共聚焦显微 分析，提示ZnT8定位于胰岛P细胞分泌囊膜上。当前国际研究一致认为 ZnT8通过影响锌离子浓度，从而在胰岛素合成与分泌中发挥重要作用' IA-2是又一个重要的胰岛细胞自身抗原，它的抗原决定簇局限于 胞内结构域中，是以前发现的胰岛细胞40 x 10³胰蛋白消化片段抗原 的前体。IA-2自身抗体（IA-2A)不但是1型糖尿病诊断分型的一个依 据，还在高危个体的预测筛查方面起积极作用^['

关于1型糖尿病GADA、ZnT8A, IA-2A的阳性率文献报道不一， 本研究结果显示GADA、ZnT8A、IA-2A,联合检测的阳性率为分别 为52.6%、24.4%, 23.1%、65.4%,与国内外多数同类研究基本一致。

胰岛细胞抗体阳性的1型糖尿病患者需要尽早注射胰岛素治疗。 多种抗体阳性的患者则更需要尽早注射胰岛素治疗。因此，选择适当 的胰岛细胞自身抗体的联合检测，可以提高1型糖尿病的诊断率。对 胰岛细胞抗体阳性的1型糖尿病患者，尽早采用胰岛素治疗保护胰岛 功能，同时预防一些并发症是非常重要的。

总之，由于研究样本的不同差异，从而引起抗体阳性率发生变 化，其统计学结果也不同，若要明确各型糖尿病与抗体之间的具体关 系，还需要更大的样本进行实验，同时需要更加深人的基础研究。

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